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酶底物法程控定量封口机与滤膜法测定地表水中粪大肠菌群
信息来源:www.waterfk.com  |   发布时间:2020年08月12日
 

粪便大肠菌群(耐热大肠菌群)是整个大肠菌群,的一部分,主要来自粪便。利用方法提高培养温度,从自然环境上为大肠菌群的生长创造了不利条件,使培养的细菌主要来自粪便中的大肠菌群,从而更准确地反映了水质被粪便污染的情况

滤膜法

过滤膜是微孔膜。将水样注入带滤膜(孔径0.45 m)的无菌过滤器中,经抽滤后,细菌被截留在滤膜上。然后将滤膜附着在培养基上,在44.5培养。计算在具有该特征的滤膜上生长的菌落数,并计算每1 L水样中的粪便大肠菌群数。

酶底物法

根据大肠菌群菌能产生特异的-D-半乳糖苷酶,分解MMO-MUG培养基中的显色底物onpg(邻硝基苯基--D-葡萄糖醛酸苷),使培养液呈黄色,以及大肠埃希氏菌菌产生特异的-葡萄糖醛酸苷酶,分解MMO-MUG培养基中的荧光底物MUG(4-甲基-伞形基--D-葡萄糖醛酸苷),使培养液能在波长为366 nm的紫外光下产生荧光的原理。确定水样中是否含有大肠菌群,粪大肠菌群(耐热大肠菌群)和大肠埃希氏菌。

程控定量封口机

测试步骤

1滤膜法

从每个样品中取出10毫升、1毫升和0.1毫升的水样品(即,分析三种稀释液),过滤,并将滤膜置于MFC培养基的表面上。盖紧培养皿后,将其置于44.50.5的恒温培养箱中242小时。选择培养基上的蓝色或蓝绿色特征菌落数,然后选择理想菌落数为20~60的稀释度(菌落总数不应超过200),计算每1 L水样中的粪便大肠菌群数。

2固定底物酶底物法

100毫升无菌采样瓶测量100毫升水样,并加入科立得TM)试剂,混合并摇匀使其完全溶解,将所有水样倒入一个97孔的无菌定量板中,用手抚平定量板的背面以去除孔中的气泡,将其放入一个44.50.2的恒温培养箱中,用程控定量封口机保温24小时,计算有黄色反应的孔的数量,并找出以MPN表表示的最可能的粪大肠菌群数量。

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