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酶底物法测定地表水中粪大肠菌群
信息来源:www.waterfk.com  |   发布时间:2020年07月21日
 

本次讲解酶底物法测定地表水中粪大肠菌群实验,用到的设备有程控定量封口机,酶底物法试剂,定量瓶等,实验详细内容请看下文。

一、实验部分

实验材料

海研试剂;100mL无菌取样瓶(里面装有1.5%的硫代硫酸钠,用于去除水样中的余氯);无菌培养定量盘(5l);海研智能程控定量封口机(5l孔定量盘橡胶托垫);51孔阳性标准比色盘;便携式培养箱。

二、实验方法

在培养温度为44.5±I℃条件下,粪大肠菌群细菌能特异性地产生β—半乳糖苷酶(β—Dgalactosidase),该生物酶可以分解ONPG(Orthonitrophenyl—β—DRalactopyranoside,β—半乳糖醛苷),使培养液呈黄色。

程控定量封口机

实验步骤如下:

1)采用100mL无菌取样瓶取100mL混匀水样r如果水样粪大肠菌群数大于2005/L,则酌情少取,并用新配置的超纯水稀释至100mL刻度线);

2)在装有水样的取样瓶中加海研试剂,充分摇匀,使试剂完全溶解;

3)把溶解完全的水样倒入无菌培养定量盘(51孔);

4)采用带51孔定量盘橡胶托垫在封lZl机上进行封装:

5)把封装好的5l孔定量盘放入44.5±1℃恒温培养箱中培养24h;

6)培养24h后,从培养箱中取出,与5l孔阳性标准比色盘进行比较(黄色孔颜色比51孔阳性标准比色盘深的表明为阳性反应),根据51孔定量盘上的阳性孔数,对照海研公司提供的MPN表,报出结果。

以上就是酶底物法测定地表水中粪大肠菌群实验方法,希望对大家有所帮助。

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